蛇胆一般位于蛇体从吻端到肛孔之间的中间部位稍偏后的位置。金环蛇和银环蛇的胆一般在从尾端向前数第11个黑环处；尖吻蝮在从尾端向前数第11个方形斑处。蛇的胆囊呈椭圆形、卵圆形或长卵形，长约0.3~5厘米，横径0.4~4厘米，大小随蛇体而异。大者如拇指，小者如花生米，再小者仅有黄豆粒大。胆囊中充满黄绿色的胆汁，故蛇的胆囊整体呈墨绿色；有的如眼镜蛇胆呈橙黄色。胆囊外衣有极细筋膜包缠于胆管并与之相连，皮膜平滑，略有弹性；胆管细而长，不易拉断。胆囊内为黏稠的胆汁，气微腥，味苦而后甜。
鲜蛇胆一般现用现剖，不宜放置过久。那么，蛇胆究竟如何剖取呢？有下列3种方法。
（1）活蛇取胆。活蛇取胆时最好两人操作，技术不熟练者负责拿着蛇头，取胆者拽尾，用另一只手从蛇腹由上至下地轻轻滑动触摸。若摸到一个滚动的小硬物那便是蛇胆，给人的感觉如同摸到人的鼻尖一样。然后，用剪刀剪开一个3厘米左右的小口，用两手指挤出蛇胆。取蛇胆时，应连同分离出的胆管一起剪下，剪至胆管的最长处，并用细线将胆管系好，以防胆汁外溢。若直接使用蛇胆的话，可不用系胆管。取出胆囊的蛇，仍可存活数天不死。由此可见，蛇的生命力有多强。
（2）杀蛇取胆。杀蛇过程中，在剖腹至蛇胆稍上方时，刀具应斜至肋骨处，以防刺破蛇胆。取出的蛇胆可挂放于通风的阴凉处，也可用60度的白酒消毒后放于白酒中贮存，或直接放于冰箱的贮藏柜中贮存待用。
（3）活蛇穿刺抽取胆汁。为了从一条蛇身上获得更多的胆汁，科研人员或养蛇人员现大多采用“活蛇穿刺抽取胆汁”的方法。抽取胆汁时，要先按住活蛇使其不能扭动，在探明胆囊的位置后，稍加压力使胆囊微凸于蛇腹面，用酒精棉球擦拭消毒后，将备好的注射器针头垂直刺人胆囊，然后徐徐抽出胆汁。
每次所抽取的胆汁以不抽尽为度，依蛇体的大小，每次可抽取0.5~3毫升，间隔1个月后可以继续抽取。抽出的胆汁，要装入已消毒干净的有色玻璃中，也可以进行真空干燥后贮存。