上帝想考验一下亚伯拉罕对他是否忠心。有一天，他呼唤亚伯拉罕。亚伯拉罕回答道：“主啊！我在这里。”耶和华就对他说：“我要你带着你的独生儿子，你的心肝宝贝以撒，到摩利亚去，在我给你指定的山上，献上他给我做祭品。”亚伯拉罕毫不犹豫，第二天一早就备好驴子，劈好了烧祭品用的木柴，带着两个仆人和他的儿子以撒，到上帝指示给他的地方去了。他们走了两天两夜，到第三天，亚伯拉罕远远地看到那座山在前边，就对他的两个仆人说：“你们和驴在这儿等候，我和孩子到那里去拜一拜，很快就会回来的。”
亚伯拉罕把祭祀用的木柴交给以撒，让他拿着，他自己手里拿着火种和刀子，两人一起往前走。在路上，以撒就问他父亲说：“父亲啊！你看祭祀用的火和木柴都有了，但祭品在哪里呢？”亚伯拉罕说：“我的儿子，你别担心，上帝会自己准备祭品的。”两人就继续前行，到了上帝所指定的地方，亚伯拉罕就在那儿筑了一个祭坛，把柴摆好，把他的儿子以撒绑了，放在坛上的木柴上。亚伯拉罕伸手拿刀，准备杀他的儿子。这时，上帝的使者在天上呼唤他：“亚伯拉罕！亚伯拉罕！”亚伯拉罕说：“主啊！我在这里。”天使对他说：“你不要对他下手，不要伤害他，我现在知道你是敬畏上帝的，因为你没有把儿子留给自己而不愿给上帝。”
这时，亚伯拉罕看到有一个公羊的两只角被树藤缠住了，就把它取下来作为上帝的祭品，以代替他的儿子。亚伯拉罕就把那地方叫做耶和华以勒，意思是“耶和华必预备”。因此，直到现在人们还常说这样一句话：“在耶和华的山上必有预备。”
上帝的使者再次呼唤亚伯拉罕，对他说：“上帝说：‘你做了善事，即使牺牲了自己的独生子也不愿意背叛我。因为这个，我要指着我自己起誓：我要赐大福给你，你的子孙必有千百万，像天上的星星和地上的沙子那么多，你的子孙会战胜他们的敌人，统治整个世界，世界也会因他们而得福——因为你不违背我的话。’”
于是，亚伯拉罕和他的儿子从原路返回，带上仆人，回到了他们的居住地。