动物细胞培养是指从动物体内取出相关的组织，再把它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
通常，动物细胞培养液中还有大量的葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和血清等。动物细胞培养能否成功的关键在于培养液中是否含有动物血清，因为动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境。动物血清是指血浆中除去纤维蛋白的液体，能提供基本的营养物质。此外，动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。
动物细胞培养的条件是：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH值（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。
动物细胞培养的基本过程：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织，将材料剪碎，并用胰蛋白酶处理（消化），分离形成单个细胞，将单个的细胞放入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，成为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理，再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，将培养10代以内的培养称为原代培养；10代以后的培养称为传代培养。培养10～50代的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分细胞发生了遗传物质的改变而出现了无限传代的特性，即癌变。此时的细胞被称为细胞系。